Pcr विश्लेषक समस्या नि: शुल्क: बारम्बार सोधिएको प्रश्नहरू र समाधानहरू

पोलीमेरार चेन प्रतिक्रिया (PCR) विश्लेषकहरू अत्यावश्यक उपकरणहरू आवश्यक उपकरणहरू हुन् जसले अन्वेषकहरूलाई क्लिनिकल निदानहरूदेखि क्लिनिकल अनुसन्धानबाट डिन्टेड गर्न अनुमति दिन्छ। जहाँसम्म, कुनै जटिल उपकरण जस्तै, एक pcrr एशिल ​​एशिलजेलले यसको प्रदर्शनलाई असर गर्ने समस्याहरूको सामना गर्न सक्दछ। यस लेखको बारेमा यो लेखले केहि साझा प्रश्नहरू सम्बोधन गर्दछPcr एयरेजजेरसमस्या निवारण र सामान्य समस्याहरूको व्यावहारिक समाधानहरू प्रदान गर्दछ।

1 मेरो PCR प्रतिक्रिया किन समावेश छैन?

प्रयोगकर्ताहरूले सामना गर्नु पर्ने सबैभन्दा सामान्य समस्याहरू मध्ये एक लक्ष्य डीएनएलाई बढाउनको लागि pcr प्रतिक्रिया हो। यो धेरै कारकहरूलाई श्रेय दिन सकिन्छ:

गलत प्राइमर डिजाइन: निश्चित गर्नुहोस् कि तपाईंको प्राइन्सहरू लक्ष्य अनुक्रमको लागि निर्दिष्ट छन् र एक इष्टतम मेल टेकि daterarra (TM) छ। शुद्धताका लागि सफ्टवेयर उपकरणहरू प्रयोग गर्नुहोस् शुद्ध डिजाइनका लागि एनन्सपेक्सिफिकेसन बाध्यकारीहरूबाट जोगिन।

अपर्याप्त टेम्पलेट डीएनए: प्रमाणित गर्नुहोस् कि तपाईं टेम्पलेट डीएनए को पर्याप्त रकम प्रयोग गर्दै हुनुहुन्छ। धेरै थोरै कमजोर वा कुनै प्रवर्धन को परिणाम हुनेछ।

नमूनामा अवरोधकहरू: नमूनामा दूषितकर्ताहरूले pcr प्रतिक्रिया रोक्न सक्छ। तपाइँको DNA शुद्ध गर्न वा एक बिभिन्न निकासी विधि प्रयोग गरी।

समाधान: तपाईंको प्राइमर डिजाइन जाँच गर्नुहोस्, टेम्पलेट एकाग्रता बढाउन, र निश्चित गर्नुहोस् कि तपाईंको नमूना निषेधकर्ताहरू समावेश गर्दैन।

2 किन मेरो pcr उत्पादन गलत आकार?

यदि तपाईंको PCR उत्पाद आकार अपेक्षित छैन भने, यसले प्रतिक्रिया सर्तहरू वा सामग्री प्रयोग हुने प्रतिक्रिया स indicate ्केत गर्दछ।

गैर-विशिष्ट प्रमोट: यो हुन सक्छ यदि एक प्राइमर अनावश्यक साइटमा बाँधियो भने। एक उपकरण प्रयोग गरेर प्राइमरको विशिष्टता जाँच गर्नुहोस् जुन विस्फोटनको रूपमा ब्लास्ट।

गलत एनेन्डिंग तापमान: यदि एनिंग तापमान धेरै कम छ भने, गैर-विशिष्ट बाध्यकारी परिणाम हुन सक्छ। मारिड pcr द्वारा annealing तापमाकरणको अनुकूलन।

समाधान: प्राइमरी विशिष्टता निश्चित गर्नुहोस् र pcr उत्पादनहरूको शुद्धता सुधार गर्न अविनाशी तापमान अनुकूलन गर्नुहोस्।

3 मेरो pcr विश्लेषक एक त्रुटि सन्देश प्रदर्शन गर्दछ। मैले के गर्नु पर्छ?

PCRR एकाइजरमा त्रुटि सन्देशहरू चिन्तित हुन सक्छ, तर तिनीहरू प्राय: सम्भावित समस्याहरूमा श्रृंगार प्रदान गर्न सक्दछन्।

क्यालिब्रेसन मुद्दाहरू: निश्चित गर्नुहोस् PCRR विश्लेषक सही रूपमा क्यालिब्रेट गरिएको छ। नियमित रखरखाव र क्यालिब्रेसन चेक सही परिणाम प्राप्त गर्न महत्वपूर्ण छ।

सफ्टवेयर समूह: कहिलेकाँही, सफ्टवेयर बगहरूले समस्या निम्त्याउन सक्छ। तपाईंको कम्प्युटर पुन: सुरू गर्नुहोस् र सफ्टवेयर अपडेटहरूको लागि जाँच गर्नुहोस्।

समाधान: खास त्रुटि कोडको लागि प्रयोगकर्ता पुस्तिकालाई सन्दर्भित गर्नुहोस् र सिफारिश गरिएको समस्या निहित चरणहरू अनुसरण गर्नुहोस्। नियमित रखरखावले धेरै समस्याहरू रोक्न सक्दछ।

4 किन मेरो pcr प्रतिक्रिया परिणामहरू असंगत छन्?

असंगत pcr परिणाम धेरै कारणका लागि निराश हुन सक्छ:

Reagent गुणवत्ता: एन्जाइम, बफरहरू, र dnts सहित सबै अभिकीहरू, ताजा र उच्च गुणवत्ताहरू छन्। म्याद सकिएको वा दूषित अभिकताहरूले परिवर्तनशीलता निम्त्याउन सक्छ।

थर्मल चक्र क्यालिब्रेसन: असंगत तापमान सेटिंग्सले PCR प्रक्रियालाई असर गर्न सक्छ। नियमित रूपमा थर्मल चक्र को क्यालिब्रेसन जाँच गर्नुहोस्।

समाधान: उच्च-गुणवत्ता रेजेन्टहरू प्रयोग गर्नुहोस् र तपाईंको थर्मल चक्र नियमित रूपमा लगातार परिणामहरू सुनिश्चित गर्न नियमित रूपमा प्रयोग गर्नुहोस्।

What। PCR प्रतिक्रिया दक्षतालाई कसरी सुधार गर्ने?

PCR प्रतिक्रियाको दक्षतालाई सुधार गर्ने उच्च उत्पादन र अधिक भरपर्दो परिणामहरू निम्त्याउन सक्छ।

प्रतिक्रिया सर्तहरू अनुकूलन गर्नुहोस्: प्राइमरहरू, प्राविधानहरू, टेम्पलेट डीएनए र MGcl2 प्रयोग गरेर प्रयोग। प्रत्येक PCR प्रतिक्रियाले इष्टतम प्रदर्शनका लागि अद्वितीय अवस्थाको आवश्यक पर्दछ।

उच्च-बेइमान एन्जाइमहरू प्रयोग गर्नुहोस्: यदि सटीकता महत्वपूर्ण छ भने, प्रमोटनको बखत त्रुटिहरू कम गर्न उच्च-अवज्ञा गरेको रक पोलिग्राम प्रयोग गर्नुहोस्।

समाधान: तपाइँको विशिष्ट pcr सेटअपको लागि उत्तम सर्तहरू फेला पार्न एक अप्टिमाइजलियलिट प्रयोग गर्नुहोस्।

संक्षिप्तमा

एक समस्या निवारण गर्दैPcr एयरेजजेरएक डरलाग्दो कार्य हुन सक्छ, तर सामान्य समस्याहरू र तिनीहरूको समाधानहरू तपाइँको PCRR अनुभव बढाउन सक्छ। यी सामान्य समस्याहरू समाधान गरेर, अनुसन्धानकर्ताहरूले PCR परिणाम सुधार गर्न सक्दछन् र आणविक जीवविज्ञान अनुप्रयोगहरूमा भरपर्दो परिणामहरू सुनिश्चित गर्न सक्दछन्। नियमित रखुरशील, सावधानीपूर्वक र प्रतिक्रियाहरूको अनुसधाकरण सफल pcr विश्लेषण गर्न कुञ्जीहरू हुन्।